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惠更斯 Array Detector Confocal 光学选项

支持蔡司 LSM780/880 Airyscan®, Fast Airyscan®, nanoSPAD 与更多的系统!



Confocal
Huygens Deconvolved superXY


惠更斯的 Array detector confocal 选项是目前唯一使备有显卡加速支持 GPU accelerated 的最大似然估计 Maximum Likelihood Estimation MLE 算法,可以跟惠更斯的 Professional、Essential或 Core 配套。Array detector confocal 模块是针对以多侦察器收集信号的共聚焦系统,目前最普遍的系统是蔡司的 Airyscan 系统 Zeiss® Airyscan (1)。

惠更斯能对 Array detector confocal 系统产生出的数据作出有效率而且可靠的处理,处理后,分辨率能高逹 90 nm 的两点分辨率。这个显微镜系统加上惠更斯的后续处理,用户可以用共聚焦的实验条件,但以更快速的方法采图,减少了光对样本的漂白与损害,再利用惠更斯处理逹到超高分辨率与高对比度的效果!

左边图像是 :
HeLa cells (MIP) imaged with Zeiss LSM 880 Airyscan system and deconvolved with the Huygens Array detector using the superXY mode. Cells are stained with anti-Ki67 and secondary-Alexa488 (magenta), Phallodin-TMR (White), and anti-alphaTubulin and secondary Abberior Star Red (shown in green). Image obtained with Zeiss Airyscan microscope kindly provided by Dr. Christoffer Lagerholm (Wolfson Imaging Centre, Weatherall Institute of Molecular Medicine, University of Oxford, UK




逹 90 nm 两点分辨率

最新测试结果,以 GattaQuant nanorulers (90,100,120 与 140nm) 测试,90 nm 的两点分辨率是透过惠更斯的处理而逹到的。

惠更斯独有的 Super Sampling

容许快速采图,但分辨率与对比度不因实验要求减低。.

对多个多侦察器系统的支持

不只是蔡司 Airyscan 的 Fast mode 与 Super resolution mode 的支持,惠更斯亦支持 nanoSPAD 与其他同类型系统。


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用户评价

"We are quite impressed with the Huygens Array Detector results"
Dr. Glyn Nelson, BioImaging Unit, campus for Ageing and Vitality, Newcastle University, UK.

"The new array detector deconvolution has allowed us to improve the resolution of Airyscan images beyond their normal limits. This is particularly useful for resolving small, clustered subcellular organelles."
Dr. Stephen Freeman, Liège Université, GIGA Cell Imaging Platform, Belgium

有关于 Array Detector Confocal 系统

对于这个系统来说,多个侦察器取代了传统共聚焦的物理针孔与单侦察器。多个侦察器在 Array Detector Confocal 来说,每一个侦察器就像是一个小针孔分布在一个阵列中(中心侦察器是传统针孔一段存在的位置),每一个小侦察器收集到的数据"总和"可以说是传统共聚焦一个大针孔收集到的信号。这个系统的优点是小针孔能保存高分辨率但多侦察器收集了大量信号!

All Detectors

The 惠更斯 Array Detector Confocal Optical Option 能够从 Array Detector Confocal 数据 (例如: Zeiss®Airyscan 系统获取的数据)获得高分辨率和对比度。 Airyscan 显微镜可用 4 种模式,而惠更斯现在可为每种单模式提供高质量的去卷积:

  • Standard mode: 这是一般共聚焦的模块,惠更斯的 license 需要选择 Confocal 光学设定。
  • Virtual pinhole mode: 这个模块是指用一个虚拟的针孔,license 也是选择一般共聚焦 Confocal 光学设定处理。
  • Super Resolution mode: 这个模块为 Airyscan super resolution 系统提供最高分辨率的图像,配合惠更斯的 super xy 逹 90 nm 两点分辨率,惠更斯的 license 需要选择 Array Detector Confocal 光学设定。
  • Fast mode: 这个模块只采用了 16 个侦察器,但在扫描过程中是以 4 线平行同时进行扫描,所以速度上更优胜。

惠更斯除了以上的支持外,对于其他类型的多侦察器共聚焦系统亦同样支持。


90 nm 两点分辨率

惠更斯的优点是高级、准确的计算方法,MLE 是目前学术界上最高级的数据处理方法,这个方法的优点是准确、对低信噪比、噪音的处理,比其他方法更优胜。
以下例子是 GATTAquant SIM100B nanorulers (一个高级显微镜校正用产品,原理是基于 DNA origami 加上莹光标签,提供显微镜校正),以下数据证明了惠更斯对分辨率的提高与准确度是肯定的!
Nanorulers 100nm
Images obtained with Zeiss Airyscan microscope were kindly provided by Dr. Christoffer Lagerholm (Wolfson Imaging Centre, Weatherall Institute of Molecular Medicine, University of Oxford, UK




Raw
Huygens Deconvolved superXY

With 80nm sampling in X and Y, you can resolve 140nm GattaQuant (2) nanorulers with the special superXY mode. Shown are MIPs. The right image is a sum of the unprocessed raw data from all detectors. Image obtained with Zeiss Airyscan microscope kindly provided by Dr. Christoffer Lagerholm (Wolfson Imaging Centre, Weatherall Institute of Molecular Medicine, University of Oxford, UK{

GATTA140B Figure
With 80nm sampling in X and Y, you can resolve 140nm GattaQuant (2) nanorulers with the special superXY mode. Shown are MIPs. . Image obtained with Zeiss Airyscan microscope kindly provided by Dr. Christoffer Lagerholm (Wolfson Imaging Centre, Weatherall Institute of Molecular Medicine, University of Oxford, UK




惠更斯软件独有的高级最大似然估计 MLE 计算方法 - 高品质与可效

与一般共聚焦系统比较,array detector confocal 提供的数据是来自多个侦察器,经过惠更斯的 MLE 处理后,分辨率与对比度提升,逹到高采图速度、高分辨率与高对比的优点。

惠更斯软件的去卷积基础,是基于光学系统的成像原理,成像原理已经可以用数学方程式描述与证实,惠更斯去卷积处理就是基于以上证据,利用最大似然估计 MLE 这个概率模型的推算,这个方法的优点是准确度高,但对于采图参数 microscopy parameters 有要求,提供的参数越完整,结果越准确、可靠。这对于显微镜厂商的文件格式,可以说是完美的互补,显微镜收集信号,并保存其精密准确的采图参数,惠更斯对参数作出正确的推算!这是惠更斯去卷积处理比其他软件优胜的原理。


快速采图、快速高质的惠更斯 super sampling 处理

Array detector confocal 或蔡司的 Airyscan 系统最大优点是对于 Nyquist rate 采像频率的要求能放松,采图速度加快、而且像素大小不再像一般共聚焦的严格,当然光对样本的毒性与伤害减低,以往采像效果不佳的共聚焦图像,利用 Array detector confocal 的采像与惠更斯的处理,现在不单可以在采像上实现,而分辨率更由惠更斯提高到超高分辨率(90 nm 两点分辨率)。

于 2016 年,蔡司®推出了Airyscan Fast mode ,利用 16 个侦察器与 4 线同步扫描的优点,使速度上与分辨率上比传统共聚焦优胜。

Array detector confocal 推荐 license 配套 (Professional/ Essential/ Core)

  • Professional/ Essential 或 Core : 必选一, 含高级去卷积功能与基本功能
  • Confocal : 对 standard mode 与 virtual pinhole 模式的支持
  • Array detector confocal 对 Airyscan super resolution mode / fast mode / NanoSPAD 与其他同类型系统的支持
  • Deconvolution and batch express : 自动去卷积功能
  • Full file reader : 对文件格式的读取
  • Time option : 对时间序列的支持
  • 可视化功能
  • 推荐大型显卡 GPU 对数据处理的支持
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1. Carl Zeiss Microscopy GmbH.
2. GATTAquant GmbH. For more information, see the GATTAquant website.