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Live cell imaging & Tracking

生細胞の追跡と画像化 



生きた細胞を扱うのは、ちょっと難しいです。 Huygens は、あなたの生活を楽にし、科学研究の質を向上させる多くのソリューションを提供します。

プロトコール: ライブデコンボリューションによる光毒性の低減

Huygens Stabilizer を使用して、ステージのドリフト、または細胞の動きを補正

素晴らしいビジュアリゼーションを作成して、同僚を感動させましょう

Object Tracker - パワフルで簡単


Huygens を使用したデコンボリューションによって、特に、ノイズの多いコンフォーカルデータがどれだけ改善されるか、私自身予想していませんでした。 ノイズの多いデータは、ライブサンプルの例外ではなく、ルールであるため、現在、Huygens を日常的に使用して、回転ディスクデータを強化しています。

ドイツ、University of Heidelberg、NIC Imaging Centre の科学ディレクター Ulrike Engel 博士。

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ミトコンドリアネットワーク(緑色)とその活動(赤色)および細胞核(青色、それぞれ、mitotracker green、TMRM および Hoechst を使用)を示すために染色された生きたヒト線維芽細胞の広視野画像。 Z スタック蛍光チャネルは、Huygens Essential でデコンボリューションされ、SFP を使用してレンダリングされました。 個々の細胞は、個々のミトコンドリアネットワーク間の細胞内変動と同様に、さまざまなレベルのエネルギー生産(赤色の強度)を持っていることがわかります。 画像提供: 英国、ニューカッスル・アポン・タイン大学の Glyn Nelson 博士。


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プロトコール: ライブデコンボリューションによる光毒性の低減

生細胞イメージングは、Huygens デコンボリューションが提供できるすべての利点から恩恵を受けます。 これらの利点の 1 つは、基になる対象物を確実に復元するのに必要なフォトンがわずかであり、細胞を健康に保ち、より長く、またはより速く測定できることです。 このプロトコールをチェックしてください:
  1. データをロードします。 すべての主要な顕微鏡ファイル形式が自動的に認識され、正しく読み込まれます。
  2. データの安定化 - Huygens Object Stabilizer を使用して、ステージのドリフト、または細胞の動きを補正します。 Z スタックの場合、ステージドリフトは、z 平面の変位を引き起こします。 Huygens Stabilizer は、これも補正します。
  3. データをデコンボリューションします - Huygens Express を使用して、自動的に、または Huygens デコンボリューションウィザードを使用して、より詳細にコントロールします。 すべての主要な顕微鏡タイプで機能します。
    • 注意: 複数のタイムシリーズがありますか? Workflow Processor は、これらすべての手順を自動化します!
  4. Huygens Movie Maker または、当社のレンダリングの 1 つを使用して、データを視覚化します。 さらに、データをあらゆる角度から見て、タイムシリーズを高速化、または低速化できます。

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Raji B 細胞と接触する Jurkat T 細胞、Raji サイトゾル(FURA-2、青色)、T 細胞受容体(抗 CD3 Alexa647、緑色)、およびアクチン(Lifeact-mRFPruby、赤色)で染色。 デコンボリューションされたタイムシリーズのアニメーション化された SFP レンダリング。 元のデータは、40x Fluor 1.3NA 油浸対物レンズを備えた Zeiss Cell Observer HS システムを使用して画像化され、Huygens Essential を使用してデコンボリューションされました。 元の時間間隔は、1 分です。 ドイツ、ザールラント大学生物物理学研究所、Christian Junker M.Sc. 氏による記録。




Huygens Object Stabilizer

Huygens Object Stabilizer は、ステージのドリフトや細胞の動きなど、望ましくないあらゆる種類のサンプルの動きを測定および補正できます。 Huygens Object Stabilizer は、2D および 3D タイムシリーズ、x、y、z の動き、軸回転、および 3D スタック内の断面の位置合わせのズレを安定させることができます。 測定とその後の安定化は、3D およびサブピクセルレベルで行われます。

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画像説明:
この広視野画像の時間画像取得は、ステージの永続的なドリフトと突然のバンプに悩まされ、赤色のリソソーム/エンドソームの適切な追跡を妨げました。 両方のステージの問題は、Huygens Object Stabilizer で補正されました。 画像は、Fascin1(アクチンに結合するタンパク質、緑色)と Lamp1(リソソーム膜タンパク質 1、赤色)が遺伝子導入されたマウス胚線維芽細胞(MEF)を示しています。 米国、ニュージャージー州、ラトガース大学、分子生物学および生化学科の Fumio Matsumura 教授のご厚意により提供。


Stabilized
Not Stabilized





Huygens ムービー メーカー

Movie Maker は、ユーザーが強力な Huygens ビジュアリゼーションツールを使用して、マルチチャネル 3D 画像の洗練されたアニメーションを簡単に作成できるようにするツールです。 ムービーギャラリーをご覧ください。

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画像説明:
ヒト線維芽細胞におけるミトコンドリアダイナミクス。 Huygens でデコンボリューションおよびレンダリングされた回転ディスク画像の 3D タイムシリーズ。 ミトコンドリアを標的とした赤色蛍光タンパク質を発現する生きたヒト線維芽細胞を 20 秒ごとに 30 分間撮影した Z スタック。 この画像は、古い線維芽細胞の細胞質のミトコンドリアネットワークの一部を示しており、時間の経過とともにどれだけの移動、融合、分裂が起こるかを示しています。 イギリス、ニューカッスル・アポン・タイン大学の Glyn Nelson 博士のご厚意によります。



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Huygens Object Tracker

Huygens Object Tracker は、タイムシリーズ画像で細胞と粒子の動きを追跡します。 Object Tracker の機械学習アルゴリズムは、いくつかの対象物とバックグラウンド領域をマニュアルで選択するだけで、新しい対象物を自動的に検出できるように十分にトレーニングされます。 付属の Track Analyzer を使用すると、すべてのトラックをフィルター処理、編集、および解析できます。 トラックから回転方向と移動速度を抽出し、移動速度、拡散係数、平均二乗変位(MSD)を計算します。 すべてのトラックデータは、有益なグラフで報告され、ファイルにエクスポートできます。

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画像説明:
Huygens Object Tracker で 50 秒間追跡された FUCCI 細胞。 オランダ、ユトレヒト大学、獣医学部、細胞 イメージングセンターの Richard Wubbolts 博士のご厚意による提供。

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