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Huygens Crosstalk Corrector

信頼性の高い解析のためのクロストークの評価と補正




クロストーク(別名、光クロストーク、表面滲みか、またはクロスオーバー)は、ある色素 からのシグナルが別の色素からのシグナルとして収集されるマルチチャネル顕微鏡の現象です、つまり、 シグナルは、実際には別の色素から来ているのに、ある色素から来ているように見えます。 これは、コロカリゼーションおよび対象物ベースの解析などのマルチチャネル解析を実 行する時に、問題を引き起こします。 Huygens CrossTalk Corrector を使用すると、複数のチャネル 間のクロストークを同時に評価して補正できます。 マルチチャネルデータに色収差が疑われる場合は、Chromatic Aberration Corrector も確認することをお勧めします。

画像説明:
ミトコンドリア(TMRM)の赤色シグナルは、クロストークのために緑色の脂肪滴(BODIPY)チャネル のシグナルとしても検出されます。 このクロストークは、脂肪滴構造の解析に深刻な影響を及ぼしま す。 両方のチャネルが上部に表示されます; 下部には、緑色のチャンネルだけが表示されます。 回 転ディスク画像は、Huygens Crosstalk Corrector(右図)で補正されました。 オランダ、Maastricht University の Kevin Knoops 氏(Microscopy CORE Lab)、Sabine Daemen 氏および Matthijs Hesselink 氏のご提供。

Before
Crosstalk corrected



 自動で簡単

画像がクロストークに悩まされているかどうかをすばやく評価し、ボタンを 2 回クリックするだけで補 正できます。


 正確な補正

2D ヒストグラムは、補正された画像の MIP を使用して評価および補正されたクロストークを示します。


 改善された解析

コロカリゼーションおよ
対象物ベースの解析などのマルチチャネル解析は、クロストーク補正後に信頼性が高くなります。





Crosstalk Corrector のメインウィンドウには、2 つのチャネルからのシグナルが 2D ヒストグラムで 表示されます(図を参照)。 このヒストグラムでは、軸に近い点は、チャネルの 1 つだけからのシグ ナルを含むピクセルか、またはボクセルを表しています。 クロストークの場合、一方のチャネル(1 つ の色素)からのシグナルは、誤って記録されたもう一方の色素からのシグナルと常にペアになります。 その結果、すべてのポイントが最初のチャネルの軸からある程度の距離に配置されます。 Corrector は、この距離を使用してクロストーク係数を自動的に評価します。 Crosstalk これは、画像のすべて の可能なチャネルペアに対して実行されます。 必要に応じて、評価をマニュアルで改善できます; こ れを支援するために、補正された画像のプレビューが表示されます。次に、コレクターは、クロストーク係数を使用して画像を補正します。



関連製品

マルチチャネル画像は、解析を実行する前に補正する必要がある何らかの形の色収差に悩まされること がよくあります。 Huygens は、例えば、さまざまな分子間のコロカリゼーションの評価など幅広い解 析オプションを提供します。

Chromatic Aberration Corrector Colocalization Analyzer


All show Crosstalk
All Crosstalk corrected
この 2 チャネルのマルチフォトン画像は、生きているマウスの脳(麻酔をかけた動物)を示しており、 ミクログリア細胞で GFP を発現し、星状細胞で CFP を発現しています。 蛍光スペクトルがオーバー ラップし、NDD 検出器が使用されたため、クロストーク/表面滲みが二重に染色された細胞があること を誤って示唆するという非常に深刻な問題があります(矢印を参照)。 Huygens Crosstalk Corrector は、表面滲みを正常に補正します。 画像は、ギリシャ、Hellenic Pasteur Institute、Neurobiology department and Light Microscopy Unit の Dimitra Thomaidou 博士グループから提供されました。

詳細:神経生物学の分野の画像