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Huygens Chromatic Aberration Corrector

チャネル間の xyz 移動、回転、スケーリング、および放射状の差異を補正




ほぼすべてのマルチチャネル画像は、ある程度の色収差を示しています。色収差は、蛍光チャネル間の焦点移動として、スケーリング、回転、および放射状(2、4、6 度)の歪みの可能性として現れます。 さらに、画像取得時の光路間の不整合は、チャネル間の水平方向(xy 方向)の移動を引き起こす可能性があります。 これらの異常は、コロカリゼーションおよび対象物ベースの解析などあらゆるタイプのマルチチャネル解析に明らかに影響するため、事前に補正する必要があります。 用途の広い Huygens Chromatic Aberration Corrector には、これらすべての色収差を正確に評価、視覚化および補正する使いやすいウィザードが含まれています。マルチチャネルデータの追加のクロストーク/表面滲みについては、Huygens Crosstalk Correctorも確認できます。

画像説明:
2 つの異なる蛍光体で染色された HeLa 細胞。この画像は、 Huygens Chromatic Aberration Corrector で補正された 2 つの異なるチャネル間の移動を示しています。 生画像データは、ドイツ、Heidelberg 、EMBL、ALMF の Yury Belyaev 博士から提供されました。


Before
Corrected


 使いやすいウィザード

マウスボタンを数回クリックするだけで、自動評価と補正を適用できます。


 正確かつ完全

Orthoslicer と対話的な 3D ワイヤーフレーム MIP を使用して、評価された歪みを視覚的に検査します。


 バッチ補正

再現性とバッチ処理のための補正テンプレートを Workflow Processor に保存します。




ユーザーの声

デコンボリューションと色収差補正により、ビーズの表現が改善されました。色の移動は、私たちの目的で問題でしたが、今では大幅に減少しているように見えるので、私たちは、満足しています。

英国、 University of Oxford 、 Wolfson Imaging Centre の研究者の Dominic Waithe 博士。
私は、8 〜 9 年間 Huygens ユーザーであり、皆さんから提供されたサポートは、素晴らしいです!

米国、 MD Anderson Cancer Center 、画像解析研究者およびインストラクターの Priyam Banerjee 博士。



信頼できる解析

色収差は、コロカリゼーションなどのマルチチャネル解析の結果または、対象物ベースの解析の一部としての 距離測定に大きな影響を与えます。 Huygens Chromatic Aberration Corrector は、いくつかの種類の 歪みを補正するための使いやすいウィザードを提供します。

画像説明:
色収差補正により、U2OS 細胞における標識 Mis12(緑色)とオーロラ B キナーゼ(赤色)間のコロカリゼーションが明らかになります。 オランダ、UMC Utrecht、UMC ユトレヒトの Livio Kleij 氏および Martijn Vroomans 氏からのデータ。
ChromAb U2OS



Wireframe 3x2 Shiftbead

広範な歪みの補正

Huygens Chromatic Aberration Corrector ウィザードは、チャネル間のミスアライメント(移動)、ス ケーリングと回転の差異、および放射状(2、4、6 度)の歪みに対処するための適切な補正セットを選 択するのに役立ちます。 放射状の変形は、光学収差によって引き起こされ、糸巻き型または、たる型の 歪みとして、または両方の組み合わせとして現れ、ヒゲの歪みとしても知られています。

画像説明:
''SFP でレンダリングされた 4 チャネル TetraSpeck® ビーズ(Thermo Fisher Scientific 社)のこのZ軸ビューに示されているチャネル間の 3D 移動に加えて、画像には他の歪みが生じる場合もあります。これらの歪みは、ウィザードによって 3D レンダリングされたワイヤーフレームとして視覚化されます。
ワイヤーフレームの例(上図)は、顕微鏡データ内に見られる典型的な歪みを示しています。 ビーズは、Cellular Imaging、 Core Facility Department of Medical Biology、 Amsterdam UMC、オランダの Ron Hoebe 博士によってコンフォーカルでイメージングされました。''



研究に使用

Ivanova、D.、Imig、C.、Camacho、M. 等。 CtBP1 を介した膜分裂は、シナプス小胞の効果的なリサイクルに貢献します。
デコンボリューションと色収差補正は、 Huygens を使用して実行されました。
Cell Rep. 30, 2444–2459 (2020).

Dumbović、G.、Sanjuan、X.、Perucho、M. 等。固定細胞の RNA およびタンパク質含有ドメインの誘導放出抑制(STED)超解像イメージング。
Huygens Chromatic Aberration Corrector を使用して、チャネル間の移動を評価しました。
Methods 187, 68-76 (2021).

詳細については、Scientific Publications を参照してください。

関連製品

マルチチャネル画像は、クロストーク(表面滲みとも呼ばれます)に悩まされることが多く、解析を実行する前に補正する必要があります。 Huygens は、例えば、さまざまな分子間のコロカリゼーションの評価など幅広い解析オプションを提供します。

Crosstalk Corrector Colocalization Analyzer

More information

点像分布関数
Huygens デコンボリューション
復元の例
色収差



mip_beforealignment+alignment_3.png
ビーズの記録は、既存の色収差を校正するための優れた方法です。 ビーズ画像の Chromatic Aberration Corrector によって提供される解析と補正の結果は、テンプレートに簡単に保存して、同様の条件下で撮影された任意の画像に適用できます。 左図: 100 nm の 4 チャネルマルチカラービーズの Huygens でデコンボリューション処理された 3D ワイドフィールドスタックの MIP レンダリングされた投影画像(TetraSpeck - Life Technologies)。 チャネル間の色収差は、デコンボリューション後に、より明確に測定および補正できます。 右図: Huygens Chromatic Aberration Corrector を使用した後の同じ画像の MIP 投影画像。拡大図を示しています。


Not aligned
Aligned
2 つの異なる蛍光体で染色された HeLa 細胞。この画像は、 Chromatic Aberration Corrector で補正された 2 つの異なるチャネル間の移動を示しています。生画像データは、ドイツ、EMBL Heidelberg 、ALMF の Yury Belyaev 博士から提供されました。

CAC WindowsRightpart
Huygens Chromatic Aberration Corrector は、移動、スケーリング、回転角度を定義する値を含む表を表示します。


Nups CAC
Huygens Chromatic Aberration Corrector は、チャネルの整列にも使用できます。 図は、核膜孔複合 体のコンフォーカル(緑色)チャネルと STED(赤色)チャネルの両方を示しています。 左の画像は、 デコンボリューションされて色収差が補正された画像を示し、中央は、色収差補正前のデコンボリュー ションされた画像を示し、右の画像は、生データを示します。 補正前は、コンフォーカルと STED チ ャネル間に明確な移動が見られます。 画像提供:ライカマイクロシステムズ。