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Huygens Re-scan Confocal Deconvolution Option

特に Re-Scan のデコンボリューションに適用



Raw Re-scan Confocal
Huygens Deconvolved

リスキャンベースのコンフォーカルイメージング用の Huygens デコンボリューションは、個別のオプションとして Essential および Professional に追加でき、リスキャン画像内の解像度、シグナル、およびコントラストを大幅に改善します。Re-scan Confocal Microscope(RCM)ハードウェアは、あらゆる蛍光顕微鏡を 3D コンフォーカルシステムに変えることができるアドオンです。 RCM は、Confocal.nl によって開発および販売されています。

画像説明:
XY および XZ(下図)の断面は、リスキャンコンフォーカル顕微鏡(RCM)画像の生および復元された画像を示しています。 Huygens は、ホットピクセル、クロストーク、ノイズ、焦点外れのシグナルを補正するために使用されました(詳細は、以下のギャラリーを参照)。 また、Z 次元での解像度の向上(1.5 ~ 2 倍)にも注意してください。 画像は、微小管(Alexa 488 標識、緑色)と TOMM20 タンパク質(Alexa 568 標識、赤色)を示しています。 画像提供: Tobias Schwarz 博士、ScopeM、ETH チューリッヒ、スイス。




研究に使用

Lucidi M、Hristu R、Nichele L、Stanciu G.A 等、リスキャンコンフォーカル顕微鏡によるアシネトバクター・バウマンニ繊維状細胞の特徴付けおよび補完的な蛍光測定アプローチ。
Huygens を使用してコンフォーカルおよびリスキャンコンフォーカル(RCM)画像をデコンボリューション処理するのに使用しました。
IEEE J. Sel. Top. Quantum Electron 27, 1-7 (2021)

詳細については、Scientific Publications を参照してください。

関連製品

最良のデコンボリューション結果は、Huygens PSF Distiller で抽出された測定 PSF を使用することで達成できます。 デコンボリューション後に、画像は、例えば、Huygens Object Analyzer を使用して信頼性の高い画像解析に使用できます。

PSF Distiller Object Analyzer

詳細情報

デコンボリューションの概要
Huygens のデコンボリューション
デコンボリューション画像



Re-scan image restoration with Huygens

1. Raw image

Huygens は、さまざまなイメージングアーティファクトを復元できます。 すべての蛍光顕微鏡データに存在するノイズ、ぼやけ、バックグラウンドに加えて、TOMM20 ミトコンドリア染色のこの特定の生のリスキャンコンフォーカルの例には、いくつかのホットピクセル(最初の画像の矢印を参照)とクロストーク(2 番目の画像の矢印で示されているように)もあります。 最初の画像は、前述のすべてのアーティファクトを含む未加工のリスキャン画像を示しています、これらは、後続の画像で 1 つずつ対処されています。 最初の復元ステップでは、Huygens Hot & Cold Pixel Remover を使用してホットピクセルを正常に除去します。

2. Hot & Cold Pixels Remover

この 2 番目の画像は、すべてのホットピクセルの効果的な補正を示しています(前の画像の矢印を参照)。 ただし、この TOMM20 チャネル(赤色)では、微小管染色に由来するシグナルの表面滲みとして見ら れるクロストークがまだあります(このページの上部にある図の緑色のチャネルを参照)。 このクロス トークは、コローカリゼーションまたは対象物ベースの解析などのマルチチャネル解析を実行する時に、 深刻な問題を引き起こします。 Huygens CrossTalk Corrector を使用すると、多くのチャ ネル間のクロストークを同時に簡単かつ迅速に評価して補正できます。


3. Crosstalk Corrector

この 3 番目の画像では、クロストークが補正されています。 画像は、Huygens 固有の Re-scan デコ ンボリューションオプションでさらに復元されました。 デコンボリューションは、逆の操 作の畳み込みによって説明できる物理プロセスによって劣化した画像を復元するために、画像復元で使 用される数学的操作です。 高度な MLE アルゴリズムを使用した Huygens の有名なデコ ンボリューションには、バックグラウンド、ぼやけおよびノイズの効果的な補正が含まれ、通常、解像 度とシグナル(コントラスト)が大幅に向上します。



4. Deconvolved

最後に、この 4 番目の画像は、このページの上部にも表示されている画像から、完全に Huygens によ って復元された TOMM20 チャネルのリスキャンコンフォーカル顕微鏡画像を示しています。

画像説明:
画像をクリックするとズームして拡大します。 TOMM20 タンパク質のリスキャンコンフォーカル画像 (Alexa 568 標識)の Huygens ソフトウェアで利用可能なツールを使用した 3 つの復元ステップを 示す画像。 画像提供: Tobias Schwarz 博士、ScopeM、ETH チューリッヒ、スイス。


Confocal RCM Decon Meiosis Highres WithText
画像は、シナプトネマ複合体の成分である SYCP3(Alexa 488 標識)に対して免疫染色された固定さ れたマウス精母細胞からの核拡散の個々の染色体を示しています。 生の画像は、リスキャンなし(左 図)とリスキャンあり(中央図)の RCM で取得されました。 生の RCM 画像は、Huygens Re-scan デコンボリューションオプション(右図)でデコンボリューション処理されました。 サンプル提供: ス ウェーデン、 Karolinska Institutet の A. Agostinho 氏および C. Höög 氏; オランダ、Confocal.nl の Erik Manders 氏によって実行されたイメージングおよび Huygens デコンボリューション。